氨基柱的活化相關(guān)說(shuō)明

氨基柱，全稱氨丙基鍵合硅膠色譜柱，色譜柱家族中較靈活的色譜柱，不僅可以用于正反相還可以應(yīng)用于離子交換（弱陰離子交換柱）中。但是需要注意的是，氨基柱的鍵合官能團(tuán)氨丙基要比C18,C8柱的鍵合官能團(tuán)更容易水解，所以要特別注意控制pH值范圍，pH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)，流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)（建議水比例不超過(guò)40%）。所以，在使用后以及準(zhǔn)備長(zhǎng)時(shí)間放置該柱時(shí)，必要的清洗和將氨基柱保存于純的有機(jī)溶劑中是很好的保養(yǎng)措施。

 

氨基柱的活化：

 

對(duì)于新氨基柱，首先應(yīng)詳細(xì)閱讀使用說(shuō)明書，了解柱子出廠保存溶劑。一般出廠會(huì)保存在正相溶劑中，如果保存溶劑與將要使用的流動(dòng)相極性不同不互溶，先用異丙醇過(guò)渡。過(guò)渡過(guò)程中應(yīng)注意異丙醇粘度較大，會(huì)導(dǎo)致柱壓很高，應(yīng)使用小流速過(guò)渡。

 

當(dāng)使用反相模式時(shí)，用前請(qǐng)使用異丙醇小流速過(guò)夜平衡色譜柱。流速建議0.1-0.2mL/min,之后再轉(zhuǎn)換到100%乙腈沖洗20柱體積，然后轉(zhuǎn)換到和流動(dòng)相相同比例的不含鹽的乙腈水體系沖洗20柱體積。

 

當(dāng)使用正相模式時(shí)，如與出廠保存溶劑互溶，可使用流動(dòng)相直接沖洗20倍柱體積；如不互溶請(qǐng)用異丙醇過(guò)渡。

 

注意事項(xiàng)：

 

正相條件：正相使用時(shí)，不宜分析含醛基、羰基的化合物，不可用于還原糖的分析

反相條件：pH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)，所以要嚴(yán)格控制pH范圍，使其pH范圍在2.0～8.0，通常建議使用范圍：pH3.0～7.0比較合適；

流動(dòng)相中水相比例越高越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)，所以應(yīng)盡量減少水在氨基柱上的保留，建議水相使用比例

短時(shí)間內(nèi)，氨基柱可保存在純甲醇，乙腈或異丙醇中，若長(zhǎng)時(shí)間不使用建議保存在異丙醇和正己烷試劑 中封存。