離子交換色譜法是通過試樣離子在離子交換劑(固相)和淋洗液(液相)之間的分配系數(shù)不同,從而使欲測組分與干擾組分達到分離的一種固-液分離法。該色譜法實際是離子交換原理和液相柱色譜技術的有機結合,現(xiàn)已廣泛應用于無機離子或有機離子混合物的分離,因此應用范圍廣泛。
離子交換色譜的優(yōu)點是:
⑴具有開放性支持骨架,大分子可以自由進入和迅速擴散,故吸附容量大。
⑵具有親水性,對大分子的吸附不大牢固,用溫和條件使可以洗脫,不致引起蛋白質變性或酶的失活。
⑶多孔性,表面積大、交換容量大,回收率高,可用于分離和制備。
離子交換色譜柱常見問題分析:
1、離子色譜柱柱壓升高可能的原因有:
(1)離子色譜柱過濾網板被玷污,需要更換。
(2)柱接頭擰得過緊,使輸液管端口變形。
(3)PEEK 材料的管子切口不齊。
2、分離度降低可能的原因有: 系統(tǒng)有泄漏時分離度會降低;分離柱被玷污后柱容量因子 k’值變小;淋洗液類型和濃度 不合適等。
3、死體積增大 分離柱入口樹脂損失造成死體積增大或樹脂床進入空氣使樹脂床產生溝流會使分離度 下降。若分離柱入口處出現(xiàn)空隙,可填充一些惰性樹脂球以減小死體積的影響。
4、保留時間縮短或延長色譜峰保留時間的改變會影響待測組分的定性和容量,因為在色譜分析中穩(wěn)定的保留時間對獲得準確、可靠的結果是十分重要的。